スポーツベット ブックメーカー種子の脂質プロファイリング抽出法

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注意: テフロン加工のスクリューキャップが付いたガラス管を使用してください. ダウンス型ホモジナイザーを使用する - すりガラスからすりガラスまで. スポーツベット ブックメーカー/溶媒の移送にはガラス製パスツール ピペットを使用する.

サンプルが大きい場合や均質化が容易な場合は、容量を 2 倍にすることができます.

1) スポーツベット ブックメーカーの重さを量る, マイクログラム残高を使用する. 乾燥重量を安定させるには、最初に凍結乾燥するのが最適かもしれません.

2) 種を 1 にドロップします.0 ml 75℃ イソスポーツベット ブックメーカーパノール、0.01% BHT. 15 分間加熱. 冷ましてください. (熱いイソスポーツベット ブックメーカーパノールはホスホリパーゼ酵素を不活化します.)

3) ホモジナイザーに移す; 徹底的に均質化する. スポーツベット ブックメーカーのために 17 ml ガラス管に移す. ホモジナイザーを 1 で洗い流します.0 ml クロロホルムと 1.すべての種子部分/脂質を回収するための 0 ml メタノール; チューブ内のイソプロパノール/種子混合物に加える. 0 を追加.8 mlの水と溶媒/種子の混合物. よく振ってください – 1段階になるはずです.

4) 1 を追加.スポーツベット ブックメーカーと 1.水 0 ml. よく振ってください. 遠心分離して相を分割する.

5) 下層（クロロホルムと脂質）を除去. スポーツベット ブックメーカー掃除するために保存.

6) 1 を追加.スポーツベット ブックメーカー, 震える, そして遠心分離機. この下層を最初と同じチューブに保存します.

7) 1 を追加.スポーツベット ブックメーカー, 震える, そして遠心分離機. この下層を上と同じチューブに保存します.

8) 少量を追加します (0.5 ml) 1 M KCl 対クロロホルム/脂質. よく振ってください; スポーツベット ブックメーカー. 上部の薄い水層を取り除いて廃棄.

9) 少量を追加します (1.0 ml) 水からクロロホルム/脂質. よく振ってください; 遠心分離機. 上部の薄い水層を取り除いて廃棄. (この逆洗により、スポーツベット ブックメーカーによって運ばれた可能性のあるタンパク質と炭水化物が除去されます.)

10) 少量まで乾燥. チューブに窒素を充填する, -20°C で保存 (冷凍庫). 発送の準備ができたら, 窒素ガスまたはスピードバック下で完全に蒸発, 約 1 に再溶解します.スポーツベット ブックメーカー. 転送先 2.スポーツベット ブックメーカー 透明ガラスバイアル、テフロン加工スクリューキャップ付き (例: 透明なスポーツベット ブックメーカー; 2mL; PTFE 裏地付きキャップ; 1/2 博士., フィッシャーサイエンティフィックカタログ #03-391-7A, サーモサイエンティフィック番号.: B7800-1). 出荷前に溶剤を蒸発させます. いつも サンプルを送る前にお知らせください: mrroth@ksu.edu