蛍光色素による in sスポーツベットアイオー 出金u ハイブリダイゼーション (ISH) シグナルの検出
- スポーツベットアイオー 出金を 2 X SSC 溶液に浸し、カバー スリップをスポーツベットアイオー 出金から落とすことでカバー スリップを取り外します.
- 次の手順を使用してスポーツベットアイオー 出金を洗浄します (バックグラウンドを減らすために、SSC 処理の温度と時間を増やすことができます).
| スポーツベットアイオー 出金、室温で 5 分間, |
| スポーツベットアイオー 出金、37°C、10 分間, |
| スポーツベットアイオー 出金、室温で 5 分間, そして |
| 1 X PBS、スポーツベットアイオー 出金 |
- ペーパータオルの上でスポーツベットアイオー 出金の水気を切ります（ただし絶対に乾かさない）. 100 µL の IgG 画分ウサギ抗ビオチンを追加 (Enzo Diagnostics #43861), 1:100 希釈)、「22 x 40」 mm のカバースリップで覆う. 37°C で 30 分間インキュベート.
- スライドを傾けるか、スポーツベットアイオー 出金浸して、カバー スリップを取り外します; 室温で 1 X PBS でスライドを 3 回洗浄します (各 5 分). 洗浄の時間と温度を変更してストリンジェンシーを調整できます.
- スポーツベットアイオー 出金傾けるか浸して、カバー スリップを取り外します.
- スポーツベットアイオー 出金を 1 X PBS 中で室温で 5 分間洗浄します.
- ペーパータオルの上でスポーツベットアイオー 出金の水気を切る, 1-µg/mL ヨウ化プロピジウムを含む退色防止溶液 (グリセロール中 10 mg/mL p-フェニレンジアミン) の薄層を追加, そしてカバースリップで覆います.
- Fスポーツベットアイオー 出金C とヨウ化プロピジウムは 450 ～ 490 nm で励起されるはずです; ハイブリダイゼーションシグナルの色は黄緑色です, 一方、染色体は赤色の蛍光を発します.
