単子葉植物 DNA の スポーツベットアイオー 入金できないと南方ハイブリダイゼーション手順
スポーツベットアイオー 入金できない
- 次のようにカクテルを作ります:
南部交雑カクテル 10 X バッファ BSA [ストック: 10 mg/mL] ddH20 RNase [ストック: 100 mg/mL] エコRI [12 単位/μL] 合計
- 20 μl のカクテルを含む各チューブに 15 μL [20 ～ 25 μg] スポーツベットアイオー 入金できない を加えます. ピペッティングを数回行って混合.
- サンプルを 37°C のオーブンで一晩[最低 10 時間]インキュベートします.
南部交雑
- 10 mg/mL 臭化エチジウム 50 μL でスポーツベットアイオー 入金できない 30 分間染色し、写真を撮る.
- ジェルを 1 L の 0 で処理.25M HCl を室温で 25 分間穏やかに振とう [ローディング バッファーの色が明るい黄色になります].
- スポーツベットアイオー 入金できない蒸留水で 2 回リンスし、1 L 0 で処理します.4M NaOH を穏やかに振盪しながら 20 分間 [ローディング バッファーの色が青色に戻ります].
- ガラス皿に 2 L 0 を満たします.4M NaOH、その上にガラス板を置きます. 「23 x 30 cM」の 3MM クロマトグラフィー紙をプレートの上に置き、端が液体 [「芯」] に浸るようにします. 紙を濡らし、ガラスピペットを紙の上で転がして気泡をすべて取り除きます.
- ウェット 2 '22.5 x 22.0 が付いている 5 cm のクロマトグラフィー用紙シート.4M NaOH を芯シートの上に置きます. スポーツベットアイオー 入金できない.
- 紙の上にジェルを上面を下にして置きます, その後、ゲルの上にナイロン膜のシートを置きます. メンブレンの正確なサイズにスポーツベットアイオー 入金できないトリミング. ステップ 4 と同様に気泡を取り除きます.
- 2 つのスポーツベットアイオー 入金できない半分の間にプラスチックのストリップを置きます.
- 「10 x 20 cm」のクロマトグラフィー紙 2 枚を濡らし、メンブレンの上に置きます. スポーツベットアイオー 入金できない.
- 全エリアをカバー, ジェルを除く, 蒸発を防止し、毛管運動がスポーツベットアイオー 入金できないみを通過するようにするためのラップ付き.
- ペーパータオルを大量に重ねてスポーツベットアイオー 入金できない領域の上に置きます. 両方のペーパータオルの束の上にガラス板を置き、その上に重りを置きます. ブロットを一晩[少なくとも20時間]放置します.
- メンブレンを 2X SSC で 5 ～ 10 分間洗浄します. すぐに使用するか、濡れたまま保管してください.
ナイロン転写膜: Hybond-XL ニトロセルロース膜, カタログ番号 RPN203S; GE ヘルスケア, 800 センテニアル アベスポーツベットアイオー 入金できない, P.O. ボックス 1327, ピスカタウェイ, スポーツベットアイオー 入金できないジャージー州 08855-1327, アメリカ; 1-800-526-3593;http://www5.gelifesciences.com.
