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胚救出用培地 (1 L 用)

  1. 1 L ビーカーに 500 mL の蒸留水を入れます.
  2. 以下を追加します:
    • 無機塩
      • ムラシゲ – スクーグ オーガニック培地 – 34.6g
      • NaH2PO4H2O (ストック 17 g/L) – 10 mL ストック
    • 有機成分
      • スクロース (最終濃度 6 %) – 30 g
      • i-イノシトール (100 mg/L ストックは 0.5 g/50 mL) – 10 mL
      • チアミン (0.4 g/l ストックは 2 g/50 mL) – 10 mL
      • アミノ酸 L-チロシン, L-アルゲニン, グリシン – 10 mL (10 mg/L ストックは各単量体 50 mg/50 mL H)2O)
      • カイネチン (非常に小さな胚のみ) – 2 mg
  3. 800 mLに希釈します。
  4. pH を 5 に調整.7 NaOH あり..
  5. 音量を 1 にします,000 mL.
  6. 8 グラムの Bacto® 寒天を追加.
  7. 寒天をスポーツベットアイオー 入金できないレンジで 3 分間溶かすか、ホットプレート上でかき混ぜながら溶かします.
  8. Kimax 培養チューブ (50 mL) に約 20 mL を注ぎ、キャップを閉めます.
  9. 15 分間オートクレーブ滅菌する.
  10. チューブに入れるか、ペトリ皿に注ぐ.