前治療
分裂組織のスポーツベット ボーナスには 2 つの目的があります. 微小管の形成を防ぐことにより, 分裂中期で細胞の分裂が停止する, したがって, 中期の細胞の数が増加する. 二番目, 染色体はさらに収縮し、短くなります, 染色体の数を計算しやすくする. 植物染色体にはいくつかのスポーツベット ボーナスが使用できます:
氷水のスポーツベット ボーナス
根が約 1 になったら切る.長さ 5 ~ -2 cm. 氷水浴で 1°C に冷却した 2 mL の水道水を含むガラスバイアルに入れます. 素材の説明を書いた小さな紙を追加, キャップチューブ, そして氷水浴に戻ります. 24 時間後に材料を修正する. 氷水スポーツベット ボーナス後の有糸分裂指数は他の処理と比べてはるかに高い, 他のスポーツベット ボーナス手順のように 3 時間だけではなく、24 時間中期で細胞が停止するため.
コルヒチンスポーツベット ボーナス
コルヒチンスポーツベット ボーナスは微小管の形成を防ぎ、, それで, 中期の細胞を停止中. 紡錘体の形成がないため、潰しやすくなります. 0 を準備してください.0 を溶解して 5 % 原液.50 mL の蒸留水中の 25 g コルヒチン (Sigma C-9754). コルヒチンは植物から分離されたアルカロイドですスポーツベット ボーナスチカム・オータムエール. 溶液を暗い瓶に入れて室温で保存.
0 を準備します.コルヒチン 0 を希釈した 05 % スポーツベット ボーナス溶液.5% 原液 1:9 (v:v) と水道水. 活発に成長している根を0で3時間スポーツベット ボーナスする.05 % コルヒチンを室温で加えて固定する. シリアルの場合、スポーツベット ボーナスを 1 で行うと便利です.5 mL 微量遠心管. 約 1 個追加.2 mL 0.05 % コルヒチン溶液をチューブに加え、ラベルを付けた根をチューブ内に置きます, 閉じて室温で 3 時間放置します. 定期的にバイアルを振って根がコルヒチン溶液に浸っていることを確認. 溶液をペーパータオル上に排出し、新しく調製した固定剤を加えます. 使用するまで冷蔵庫に保管してください.
コルヒチン処理後の有糸分裂指数は、氷水スポーツベット ボーナスに比べてはるかに低い, ただし、コルヒチンスポーツベット ボーナスは染色体の形態をよりよく保存するため、染色体を C バンディングによって分析する場合に推奨されます. この治療の後、姉妹染色分体はばらばらになる傾向があり、セントロメアによってのみ接続されています. 治療が長すぎる場合, セントロメアも分裂します. しかし, 後期の移動は起こらないため、姉妹染色分体は互いに近くに位置します (スキーペア).
1-モノブロモナフタレンスポーツベット ボーナス
1-モノブロモナフタレン (α-モノブロモナフタレン) も紡錘体の形成を防ぎ、細胞を中期で停止させます. 飽和水溶液中で使用されます, 数ミリリットルのモノブロモナフタレンを 500 mL の水道水に加えることによって得られます, 震えている, そして落ち着く. 未溶解の 1-モノブロモナフタレンは、要件に応じて水道水を加えて再利用できます.
8-ヒドロキノリンスポーツベット ボーナス
8-ヒドロキノリンによる治療は紡錘体の形成を妨げないが、染色体を中期で停止させる. 0 を準備してください.002 M 8-ヒドロキノリン (Sigma Q-3126) の水道水溶液, 活発に成長している根をこの溶液で室温で 3 時間処理します. この手順では、コルヒチンおよび 1-モノブロモナフタレンによるスポーツベット ボーナスと比較して、同様の有糸分裂指数が得られます. しかし, 小さな二次狭窄を特定するのに特に役立ちます, これらの領域は治療後に拡張されるため.